ClonePix 2 高通量细胞克隆筛选系统——更少时间筛选出更多、更好的细胞克隆
ClonePix 2 系统使用半固体培养基培养细胞,生长出单个的细胞克隆。细胞克隆表达的蛋白分泌到胞外和培养基里的荧光检测试剂结合。表达蛋白越多,克隆周围荧光强度越强。ClonePix 2 检测的不是单个时间点的荧光强度。随时细胞生长,蛋白表达的积累,软件检测的是整个培养周期内所有蛋白累积的荧光值。适用于杂交瘤的筛选以及多种稳定细胞系的筛选。
ClonePix 2 拥有白光和荧光两套成像系统。白光成像识别克隆,荧光成像定量检测克隆的荧光强度。软件根据每个克隆的大小,外形,距离,荧光强度等参数对克隆进行筛选。自动化机械臂可以挑取符合要求的克隆到96孔板。
ClonePix 2 系统可以统计计算每个克隆的平均荧光强度,根据荧光强度对所有克隆进行排列,最后只挑取荧光符合要求的克隆。这个成像、统计计算、排列的过程就是代替传统 ELISA 对克隆进行初步筛选的过程。关键的是整个筛选和挑取过程完全自动化。
主要特点:
1. 使用半固体培养基培养细胞,获得独立的单个细胞克隆
2. ClonePix 系统可以快速筛选上万个克隆
- 大大增加找到克隆的概率
- 白光成像用于识别克隆位置
- 荧光成像用于定量表达水平
3. 多种检测方法可选
- 不用标记,直接检测杂交瘤分泌的 IgG 或抗原特异性 MAbs
- 检测加入标记的重组蛋白或表达的荧光标记蛋白
4. 客观的成像分析,使用户可以准确筛选到表达水平的克隆,并尽可能早的排除表达水平低的干扰克隆
5. 准确、自动化的挑取克隆,避免出现类似有限稀释的错误
6. 高通量:5个荧光通道;8个独立挑头,200克隆/小时。
7. 高产量:和传统有限稀释方法相比,筛选克隆时间缩短一半,筛选到的克隆产量提高一倍。
8. 高灵活性:适用于多种细胞类型:贴壁细胞,悬浮细胞(杂交瘤,CHO,HEK,昆虫细胞等)。
9. 自动化:成像,筛选,挑克隆过程完全自动化。
10.污染控制:封闭系统,内部紫外灯照射;100级空气过滤器;针头洗槽,加热干燥模块。
应用领域:
1. 抗体开发
(1)选择合适的分泌细胞系
(2)细胞系开发用于生物治疗
(3)去除不稳定的克隆
2.抗体发现
(1)找出高产的杂交瘤细胞系用于抗体发现
(2)筛选抗原特异性杂交瘤或B细胞
3. 蛋白表达和生产
(1)挑取和开发表达 GPCR 的细胞系
(2)利用报告蛋白筛选
(3)利用细胞表面标记物筛选
(4)筛选分泌重组蛋白的细胞
4. 干细胞筛选